Molecular and parasitological detection of Leishmania spp. in dogs caught in Palmas, TO, Brazil / Detecção molecular e parasitológica de Leishmania spp. em cães capturados em Palmas, TO, Brasil

This study evaluated occurrences of Leishmania infantum in dogs in the municipality of Palmas, Tocantins, comparing diagnostic data obtained using the polymerase chain reaction (PCR) and parasitological diagnosis. Blood samples and lymph node aspirates were collected from 63 dogs of males and females and various ages and races, with or without owners, between August 2009 and June 2010. Slides containing smears of lymph node aspirates were stained with Giemsa stained. In PCR, the 145 bp target sequence of the LT1 fragment, located in the Leishmania donovani kDNA minicircle was detected using the RV1 and RV2 oligonucleotide primers. The chi-square test revealed that there was a significant relationship between the symptoms and dogs that were positive for visceral leishmaniasis (VL). The parasitological investigation showed concordance of 66.7% with PCR on blood and 84.1% with PCR on lymph node aspirate. In addition to these tests, evaluations of the diagnoses in parallel and in series were conducted, which showed concordances with the parasitological test of 76.2% and 74.6%, respectively. The results make it possible to suggest that PCR on lymph nodes should be used in evaluating large populations (surveys) and that the parasitological test should be used for initial clinical evaluations in veterinary consultation offices.

Avaliou-se a ocorrência de Leishmania infantum em cães do município de Palmas-TO, comparando dados diagnósticos obtidos pela Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e pelo diagnóstico parasitológico. Foram coletadas amostras de sangue e de aspirado de linfonodo de 63 cães machos e fêmeas, várias idades e raças, domiciliares ou não de agosto de 2009 a junho de 2010. As lâminas contendo esfregaço dos aspirados de linfonodos foram coradas pelo corante Giemsa. Na PCR, a sequência alvo de 145 pb do fragmento LT1, situado no minicírculo do kDNA do grupo Leishmania donovani, foi detectada através dos oligonucleotídeos iniciadores RV1 e RV2. O teste χ² (Qui-quadrado), demonstrou haver relação significativa entre a sintomatologia e a positividade dos cães para Leishmaniose Visceral (LV). O exame parasitológico mostrou uma concordância de 66,7% com a PCR em sangue e 84,1% com a PCR de aspirado de linfonodo. Além destas análises, houve a avaliação dos diagnósticos em paralelo e em série, onde as concordâncias com o exame parasitológico foram de 76,2% e 74,6%, respectivamente. Os resultados permitem sugerir a utilização da PCR de linfonodos na avaliação de grandes populações (inquéritos), e o exame parasitológico para a avaliação clínica inicial em consultórios veterinários.

Diagnosis of Leishmania (Leishmania) chagasi infection in dogs and the relationship with environmental and sanitary aspects in the municipality of Palmas, state of Tocantins, Brazil / Identificação de cães infectados por Leishmania (Leishmania) chagasi e sua relação com aspectos ambientais e sanitários no município de Palmas, estado do Tocantins, Brasil

INTRODUCTION: The aim of the present study was to identify the presence of Leishmania (Leishmania) chagasi infection in dogs in the City of Palmas, Tocantins, Brazil, using the PCR technique to list the hot spots of infected dogs in the city and associate their occurrence to significant environmental changes at capture sites. METHODS: DNA was extracted from blood of dogs, and the PCR were performed with primers RV1/RV2. After screening the population studied, the regions of the city that had the highest occurrence of canine infection were detected. These sites were visited, and ecological parameters denoting anthropogenic disturbance were evaluated. RESULTS: Some important features were listed in the regions visited, such as low urbanization, lack of public collection of sewage, limited garbage collection, vacant lots with tall vegetation, decaying organic matter, and, most importantly, the occurrence of stray dogs and poultry in homes. CONCLUSIONS: The methodology for screening the population was very efficient, especially in evaluating a large number of individuals in a short time, with a high degree of automation. The results indicate an association between the observed parameters and the occurrence of infection in dogs. The model presented in the city is ideal for studies of disease progression and expansion and for the evaluation of control measures adopted for canine VL.

INTRODUÇÃO: O estudo foi realizado com o objetivo de identificar, através da PCR, a presença da infecção por Leishmania (Leishmania) chagasi em cães no município de Palmas, no Estado do Tocantins, Brasil, de modo a elencar os hot spots de cães infectados no município e associar sua ocorrência a alterações ambientais marcantes nos locais de captura. MÉTODOS: O DNA foi extraído do sangue dos cães e as reações de PCR foram realizadas com os primers RV1/RV2. Após o screening da população estudada, foram detectadas as regiões do município que apresentavam as maiores ocorrências da infecção canina. Esses locais foram visitados, e parâmetros de distúrbio ecológico com origem antrópica foram avaliados. RESULTADOS: Algumas características importantes foram constantes entre as regiões visitadas, entre elas a baixa urbanização, inexistência de coleta pública de esgoto, coleta publica de lixo pouco abrangente, lotes vagos com vegetação alta, e matéria orgânica em decomposição, com destaque para criação de cães soltos, e aves nas residências. CONCLUSÕES: A metodologia adotada para screening da população se mostrou bastante eficiente, sobretudo na avaliação de um grande número de indivíduos em tempo reduzido, com alto grau de automatização. Os resultados apresentados indicam associação entre os parâmetros observados e a ocorrência da infecção em cães. O modelo apresentado no município é ideal para estudos do desenvolvimento da doença, bem como sua expansão, além da avaliação das medidas de controle adotadas para a leishmaniose visceral canina.